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ATCC細(xì)胞培養(yǎng)方法

 更新時(shí)間:2023-05-19 點(diǎn)擊量:976

ATCC,全名為:American Type Culture Collection,細(xì)胞庫(kù)的細(xì)胞數(shù)量排名qian列。ATCC細(xì)胞培養(yǎng)方法,廣泛應(yīng)用于生產(chǎn)領(lǐng)域和生物醫(yī)學(xué)研究,已成為細(xì)胞培養(yǎng)的標(biāo)準(zhǔn)。該方法共分為6大步驟,分別是:

一、培養(yǎng)基的選擇:細(xì)胞種類不同,培養(yǎng)基的選擇不同,常見的培養(yǎng)基有:MEM培養(yǎng)基、RPMI培養(yǎng)基、DMEM培養(yǎng)基等。根據(jù)細(xì)胞類型不同,選擇性的加入10%的胎牛血清、抗生素、抗真菌藥物等。

二、細(xì)胞的準(zhǔn)備:取出細(xì)胞,置于無(wú)菌條件,用PBS(含有鈣和鎂)2-3次洗滌細(xì)胞,去掉凍存液。

三、細(xì)胞的接種:將細(xì)胞轉(zhuǎn)移到無(wú)菌培養(yǎng)皿(含有培養(yǎng)基)。培養(yǎng)皿容積應(yīng)根據(jù)培養(yǎng)時(shí)間、細(xì)胞數(shù)量來(lái)確定。

四、細(xì)胞培養(yǎng):將培養(yǎng)皿放置在37℃的培養(yǎng)箱中,保持濕潤(rùn)的環(huán)境。定期更換培養(yǎng)基(頻率為:2天/次)。細(xì)胞密度需要控制,不要過(guò)度密集。

五、細(xì)胞分離:細(xì)胞密度達(dá)到一定程度后,用胰酶或EDTA等酶類將細(xì)胞進(jìn)行消化,消化后的細(xì)胞分離到新的培養(yǎng)皿中。

六、細(xì)胞凍存:細(xì)胞密度適中時(shí),用液氮來(lái)凍存細(xì)胞。

注意:1.細(xì)胞培養(yǎng)的整個(gè)過(guò)程都需要消毒處理,防止細(xì)胞被污染 。

   2.定期檢查細(xì)胞的各項(xiàng)指標(biāo),如生長(zhǎng)情況細(xì)胞狀態(tài)、是否污染等。

上述ATCC細(xì)胞培養(yǎng)方法,助您細(xì)胞培養(yǎng)一臂之力!


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